Staphylocoques : Identification, diagnostic
-Les staphylocoques du genre Gram positif sont des cellules non sporulées, non mobiles et sphériques, généralement disposées en grappes semblables à celles du raisin
Les 3 principales espèces d’importance clinique sont :
– Staphylococcus aureus
– Staphylococcus epidermidis
– Staphylococcus saprophyticus
Les autres espèces de ce genre, de moindre importance, sont
– Staphylococcus lugdenenses
– Staphylococcus hominis
– Staphylococcus warneri
Caractéristiques du genre Staphylocoques
– Il peut facilement se développer en milieu ordinaire dans des conditions aérobies et micro-aérophiles
– se développent plus rapidement à 37 °C mais forment le meilleur pigment à une température ambiante de 20-25 °C
– Les colonies en milieu solide sont rondes, lisses, en relief et brillantes.
– Certains d’entre eux sont des flores normales de la peau et des muqueuses humaines, d’autres provoquent la formation d’abcès de suppuration et/ou une septicémie mortelle
– capable de produire de la catalase, les différenciant des streptocoques.
– relativement résistant au séchage, à la chaleur et au NacI à 9 %, mais facilement inhibé par l’hexachlorophène 3%
Structure antigénique
- Peptidoglycane( Mucopeptide) : Polysaccharide polymère qui fournit l’exosquelette rigide de la paroi cellulaire. Il est important dans la pathogenèse de l’infection, car il provoque la production de cytokines et d’anticorps opsoniques, il est chimio-attractif pour les polymorphes et il active le complément
- Acide teichoïque : Polymère de glycérol ou de phosphate de ribitol
- Protéine A : importante dans le test de diagnostic immunologique (test de coagglutination).
- Capsule : Propriété antiphagositique
Production Enzymatique
– La catalase – produite par les staphylocoques – transforme le peroxyde d’hydrogène (H202) en eau (H20) et en oxygène (02)
Le test de Catalase différencie les staphylocoques (catalase positive) des streptocoques (catalase négative)
– Coagulase – Caillots de coagulase dans le plasma oxydé ou citraté. La coagulase peut déposer de la fibrine à la surface de l’organisme et modifier l’ingestion par les cellules phagocytaires.
– Facteur de regroupement : Un composé de surface responsable de l’adhésion de l’organisme au fibrinogène et à la fibrine produite par Staphylococcus aureus détermine le potentiel d’invasion de l’organisme.
– Le test de coagulase différencie S.aureus (coagulase-positif) de S.epidermidis (coagulase-négatif)
– Hyaluronidase – Facteur de propagation
– Protéinases et lipases
– Staphylokinase- Fibrinolysine
– β-lactamase-Procure la résistance du staphylocoque à β-lactam
– antibiotique comme la pénicilline.
– Dnase : Désoxyribonucléotidase
– Nuclease
Toxines
– Exotoxines (α, β, γ, δ) Entérotoxine produite par S. aureus lorsqu’elle est cultivée dans des aliments glucidiques et protéiques. Toxines multiples (A-E, G-I, K-M) solubles, thermostables et résistantes aux enzymes intestinales, qui agissent sur les récepteurs neuraux de l’intestin pour stimuler le centre du vomissement dans le système nerveux central. C’est un super antigène qui provoque une intoxication alimentaire staphylococcique
– Toxine du syndrome de choc toxique – Toxine desquamante super-antigène produite par S.aureus et qui provoque fièvre, choc, défaillance de plusieurs organes et éruption cutanée.
– Toxine exfoliante – Super antigène épidermolytique produit par S.aureus et qui utilise la desquamation généralisée de la peau (syndrome de la peau échaudée staphylococcique).
– Toxine épidermolytique A : produit de gènes chromosomiques et stable à la chaleur
– Toxine épidermolytique B : à médiation plasmidique et thermolabile
– Leucocidine : toxine S aureus qui tue les globules blancs en y formant des pores et en y augmentant la perméabilité des cations
Caractéristiques cliniques
– Folliculite : Infection d’un follicule pileux.
– Anthrax staphylococcique : Infection de plusieurs follicules pileux et de la peau environnante.
– Cellulite : Infection de la peau et des tissus sous-cutanés (à ne pas confondre avec les capitons gras qui apparaissent sous la peau, et qui portent le même nom) .
– Formation d’abcès : suppuration focale
– La mammite : Infection du sein, en particulier chez la mère allaitante
– Impétigo bulleux : lésion cutanée superficielle croûtée
– Pneumonie : Infection du parenchyme pulmonaire.
– Empyème : Accumulation de pus dans l’espace pleural
– L’ostéomyélite : Infection des os
– Endocardite et méningite : Infection du tissu cardiaque et leptomeninges respectivement.
– Empoisonnement alimentaire : Causée par l’entérotoxine produite par S.aureus Caractérisée par de violentes nausées, des vomissements et des diarrhées
– Le syndrome de choc toxique : Causée par le syndrome de choc toxine-1 produit par S.aureus Caractérisée par l’apparition brutale d’une forte fièvre, de vomissements, de diarrhées, de myalgies, d’éruptions scarlatines et d’hypotension avec insuffisance cardiaque et rénale dans les cas les plus graves Se produit dans les 5 jours suivant le début des règles chez les jeunes femmes qui utilisent des tamponnages
– Syndrome de la peau échaudée par un staphylocoque : Causée par une toxine exfoliante produite par S.aureus.
– S. saprophyticus : Cause relativement fréquente des infections urinaires chez les jeunes femmes
– S. epidermidis : cause occasionnelle d’infection souvent associée aux appareils et dispositifs implantés
Diagnostic de laboratoire
Spécimen : Tampons de surface, pus, sang, crachats, liquide céphalorachidien
Frottis : Cocci Gram positif en grappes, seuls ou par deux.
La culture : Croissance bien aérobie et dans un milieu ordinaire enrichi en CO2 à une température optimale de 35°c-37°c.
Aspect des colonies : S.aureus : colonies typiquement dorées.
Fréquemment non pigmentée après une incubation de nuit.
Hémolytique sur plaque de gélose au sang.
7,5% de milieux contenant du Nacl sont utilisés pour les spécimens contaminés par la flore mixte
La gélose au sel de mannitol est utilisée pour le dépistage des porteurs nasaux de S. aureus
– S.epidermidis : colonies blanches, non hémolytiques
– S.saprophyticus : peut être blanc ou jaune, non hémolytique.
Réaction biochimique
1. Test de Catalase
2.Test de coagulase
Test de diapositives : Pour détecter la coagulase liée
Agglomération en 10 secondes……… S.aureus
Pas d’agglutination dans les 10 secondes ……….CONS(Coagulase negative staphylococci)
Test en tube : Pour détecter la coagulase libre
Caillot de fibrine……… S.aureus
Pas de caillot de fibrine……CONS(Staphylocoques à coagulase négative)
Tests de sensibilité :
Novobiocine sensible—– S.aureus et S.epidermidis
Résistant à la novobiocine……..S.saprophyticus
– La source d’infection est l’excrétion des lésions humaines, des voies respiratoires et de la peau.
– La propagation de l’infection par contact se produit dans les hôpitaux