Gélose Salmonella-Shigella (SS) : Principe, composition, préparation, inoculation et morphologie de la colonie
Salmonelle shigella (SS) Agar : isolement et milieu différentiel pour les bacilles Gram négatif pathogènes, en particulier Salmonella et shigella. inhibiteur pour les coliformes.
Qu'est-ce que la gélose Salmonella-Shigella
La gélose SS est recommandée comme milieu sélectif et différentiel pour l’isolement de Salmonella et de certaines espèces de Shigella à partir d’échantillons cliniques et non cliniques.
Il a été développé à l’origine comme un milieu sélectif pour l’isolement des espèces de Salmonella et Shigella. Il a également été développé pour aider à différencier le lactose et les fermenteurs autres que le lactose des échantillons cliniques, des aliments suspects et d’autres échantillons de ce type.
Malgré son nom, Salmonella-Shigella ou gélose SS, elle ne convient pas à l’isolement des shigelles car elle est inhibitrice pour la plupart de ses souches.
Quel est le principe de la gélose Salmonelle-Shigella
Reaction on salmonella shigella (SS) agar
- La gélose SS est un milieu sélectif et différentiel utilisé pour l’isolement de Salmonella et de Shigella
- Les agents sélectifs sont les sels biliaires et le colorant vert brillant, qui inhibent les organismes gram-positifs
- Le milieu ne contient que du lactose comme agent différentiel et se différencie donc sur la base de la fermentation du lactose
- la formation d’acide lors de la fermentation du lactose provoque la formation de colonies roses par l’indicateur rouge neutre
- Les organismes qui ne fermentent pas le lactose sont incolores sur le milieu
- La gélose SS contient du thiosulfate de sodium et du citrate d’ammonium ferrique, ce qui permet de différencier les organismes qui produisent du H2S
-Les fermenteurs de lactose, tels que E. coli, ont des colonies qui sont roses
-Shigella apparaît en transparence dans l’ambre
-La salmone semble transparente ou ambrée avec des centres noirs en raison de la production de H2S
La base de la différenciation sur la gélose Salmonella Shigella dépend de la capacité à fermenter le lactose et de l’absorption du rouge neutre lorsque les sels biliaires précipitent à l’état acide. Le rouge neutre devient rouge en présence d’un pH acide produit par les bactéries, montrant ainsi qu’une fermentation a eu lieu.
L’inclusion de sels biliaires, de citrate de sodium et de vert brillant sert à inhiber les organismes gram-positifs et coliformes. Les salmonelles, les Shigella et d’autres organismes ne fermentant pas le lactose apparaissent sous forme de colonies incolores transparentes ou translucides sur la gélose SS.
Le thiosulfate de sodium est ajouté au milieu comme source de sulfure d’hydrogène, et le citrate ferrique est ajouté comme indicateur de la production de sulfure d’hydrogène.
Alors que l’agar est le gel qui se solidifie.
Quelle est la composition de la gélose Salmonella-Shigella
Ingrédients par litre d’eau déionisée :
– Lactose 10.0gm
– Sels biliaires n° 3 8,5 g
– Citrate de sodium 8,5 g
– Thiosulfate de sodium 8,5 g
– Extrait de bœuf 5,0 g
– Protéine Peptone 5.0gm
– Citrate de fer 1.0gm
– Vert brillant 0,33 mg
– Rouge neutre 0,025gm
– Agar 13.5gm
Le pH final obtenu est de 7,0 +/- 0,2 à 25ºC.
Comment préparer la gélose Salmonella Shigella
- Suspend 60 g of the medium in one liter of deionized if available or distilled water.
- Mix well.
- Heat with frequent agitation and boil for one minute.
- Sterilization in autoclave is not necessary.
- Pour into plates
- Let the agar solidify and store in the refrigerator (avoid freezing). Prepared culture media can be kept for at least a week in refrigeration.
Note: Various commercial suppliers now supplies ready to use culture plates.
L’agar SS doit être clair et de couleur rouge-orange.
Prélèvement d’échantillons : Le matériel ou l’échantillon infectieux doit être soumis directement au laboratoire sans délai et protégé de la chaleur et du froid excessifs. En cas de retard dans le traitement, l’échantillon doit être inoculé sur un support de transport approprié et réfrigéré jusqu’à l’inoculation.
Comment inoculer et cultiver la gélose Salmonella Shigella
Après la préparation,
– Laissez les plaques se réchauffer à température ambiante et la surface de l’agar sécher avant de l’inoculer.
– Inoculer fortement et stripper le spécimen dès que possible après le prélèvement.
– Si l’échantillon à cultiver se trouve sur un écouvillon, faites rouler l’écouvillon sur une petite zone de la surface de l’agar.
– Streak pour l’isolement avec une boucle stérile.
– Incuber les plaques en aérobiose à 35-37 degrés C. pendant 18-24 heures.
– Examiner la morphologie coloniale.
Comment interpréter les colonies après culture sur l'AGAR SS
– En cas de fermentation du lactose, le milieu devient rouge en raison du pH acide. Par exemple, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae
– Les salmonelles, les Shigella et autres fermenteurs sans lactose apparaissent sous forme de colonies incolores transparentes ou translucides sur l’agar-agar SS.
– Des colonies de Salmonella spp. peuvent apparaître avec ou sans centre noir.
Toutefois, il est recommandé d’effectuer des tests biochimiques, immunologiques, moléculaires ou de spectrométrie de masse sur des colonies issues de cultures pures pour une identification et une conclusion complètes.
Quelle est la morphologie coloniale sur la gélose Salmonella-Shigella
SS agar colony morphology,image from hardydiagnostics
Les autres micro-organismes auront la morphologie de colonie suivante
– Pseudomonas Irrégulier, croissance légère
– Bactéries à Gram positif Pas de croissance
– Enterobacter/Klebsiella Légère croissance, rose